Dihüdroetiidium

Dihüdroetiidium (DHE) on tavaliselt kasutatav superoksiidi anioonide fluorestsentstuvastussond. DHE siseneb vabalt rakku ja dehüdrogeneerub intratsellulaarsete superoksiidi anioonide juuresolekul etiidiumbromiidi tootmiseks. Etiidiumbromiid seondub rakusiseste nukleiinhapetega ja tekitab punast fluorestsentsi. Kui intratsellulaarne superoksiidi anioonide tase on kõrge, siis mida rohkem etiidiumbromiidi toodetakse, seda suurem on fluorestsentsi intensiivsus ja vastupidi, seda nõrgem on fluorestsentsi intensiivsus. Seetõttu saab seda kasutada intratsellulaarse superoksiidi aniooni taseme tuvastamiseks.

Laev kuiva jääga; Hoida 6 kuud temperatuuril -20 kraadi valguse eest kaitstult.

Märkus. Ülaltoodud reaktsioonide loendeid analüüsiti 6-süvendiga plaadisüsteemi jaoks.

1. See toode on 5 mM dihüdroetiidiumi (superoksiidanioonfluorestsentssond) põhisegu, mis lahjendatakse sobiva söötme või puhvriga DHE töölahuseks (tavaliselt piisab katseks 1-10 μM);

2. Peske normaalseid või töödeldud rakke 1-2 korda PBS-i või muude puhvritega;

3. Pärast pesupuhvri eemaldamist lisage 1 ml DHE töölahust ja inkubeerige 30 minutit valguse eest kaitstud rakukultuuri inkubaatoris;

4. Eemaldage DHE töölahus ja peske 1-2 korda PBS-i või muude puhvritega;

5. Katse vastava instrumendi all; DHE ise on sinine fluorestsents, Ex on 355 nm, Em on 420 nm; Kui DHE dehüdrogeneerub ja seondub nukleiinhappega, näitab see punast fluorestsentsi, Ex on 520 nm, Em on 605 nm.

1. Rakkude erinevat tüüpi ja omaduste tõttu saab sondi töökontsentratsiooni ja inkubatsiooniaega vastavalt katse vajadustele kohandada.

2. Sondi töölahus, pesupuhver jne tuleb eelnevalt soojendada ja töödelda, et vältida rakke mõjutavat temperatuurierinevuse stimuleerimist.

3. Fluorestseeruvad värvained on kustutatavad ja protsessi tuleb kaitsta valguse eest.

4. Dihüdroetiidium oksüdeerub õhu käes kergesti, vältige nii palju kui võimalik kokkupuudet õhuga, soovitatav on säilitada väikeste portsjonitena ning vältida korduvat külmutamist ja sulatamist.

5. Oma tervise ja ohutuse tagamiseks kandke töötamise ajal laborikitlit ja kindaid.

Ainult uurimistööks kasutamiseks!

Kuum tags: dihüdroetiidium, Hiina dihüdroetiidiumi tootjad, tarnijad, tehas