BCECF, AM Fluorescence PH Assay Kit

 

Toote nimi	Kass.Ei.	Spec..
BCECF, AM fluorestsentsi pH analüüsi komplekt	G1726-100T	100 T

 

 

Intratsellulaarne pH mängib olulist rolli paljudes rakulistes tegevustes, nagu rakkude kasv, ensüümide aktiivsus, ioonide transport ja muud protsessid. BCECF, AM on rakku läbilaskev pH fluorestseeruv värv, mida kasutatakse laialdaselt rakusisese pH muutuste jälgimiseks, vastandades kahekordse ergastuse lainepikkuste suhe. BCECF, AM ei ole fluorestseeruv ja rakusiseste esteraaside poolt rakku sisenemisel BCECF-iks lõigatakse, jäädes seega rakusse. BCECF, AM on laialdaselt kasutatud mitte ainult imetajarakkudes, vaid on teatatud ka selle kasutamisest. rakusisese pH taseme jaoks loomsetes kudedes, taimerakkudes, bakterites ja pärmseentes.

See komplekt põhineb ülaltoodud tuvastamispõhimõttel, mille põhiosa on BCECF, AM ja pakub spetsiaalset sobituspuhvrit, mida on lihtne kasutada ja mis on tuvastamiseks tundlikum. Seda saab kasutada intratsellulaarse pH dünaamilise muutuse jälgimiseks fluorestsentsmikroskoobi, ensüümide märgistamise instrumendi ja muude vastavate instrumentidega.

 

 

Transporditakse kuival jääl; hoida kuivas ja valguse eest kaitstult temperatuuril -20 kraadi. Kehtib 12 kuud.

 

 

KomponentNumber	Komponent	G1726-100T
G1726-1	BCECF, AM fluorestsentssond	20 μL
G1726-2	pH testimise puhver	20 ml
Käsiraamat		1 tk

Märkus. Ülaltoodud komplekti reaktsiooniajad vastavad 96-süvendplaadi analüüsisüsteemile.

 

 

1. Katseeelsed ettevalmistused:Rakud inokuleeriti eelnevalt 96-süvendiplaatidele teatud tihedusega ja rakke töödeldi vastavalt katse eesmärgile;

 

2. BCECF, AM analüüsi töölahuse valmistamine:vastavalt ettevalmistusvajaduseleBCECF, AM analüüsi töölahus, võib ettevalmistussüsteemile viidata järgmisele tabelile, pange tähele, et rakkude erinevad omadused on erinevad, vastavalt katse tegelikule olukorrale saab lisada või vähendada kasutatud sondi kontsentratsiooni, esialgne soovitus lahjendussuhteks 1: 500;

 

	1 näidis	10 näidist	100 näidist
BCECF, AM fluorestsentssond	0.2 μL	2 μL	20 μL
pH testimispuhver	100 μL	1 ml	10 ml

 

3. Värvimismarkerid(kleepuvate rakkude puhul; suspensioonirakke tuleb iga kord tsentrifuugida ja vahetada):

3.1 Eemaldage algne rakukultuuri sööde ja peske rakke 1-2 korda PBS-i või muude puhvritega;

3.2 Eemaldage pesupuhver, lisage igasse süvendisse 100 μL BCECF, AM analüüsi töölahust ja inkubeerige 30 minutit 37 kraadi juures valguse eest kaitstud rakukultuuri inkubaatoris;

3.3 Inkubeerimise lõpus eemaldage BCECF, AM analüüsi töölahus ja peske rakke 2-3 korda, kasutades PBS-i või muid puhvreid;

Märkus. Peske BCECF, AM analüüsi töölahus välja.

3.4 100 Fluorestsentsi tuvastamiseks lisati μL puhvrit.

4. pH kalibreerimine(pH kalibreerimine näiteks nigeritsiini meetodil, valikuline):

4.1 Valmistage eelnevalt ette erineva pH-ga puhvrid (nt 6,6, 7.0, 7,2, 7,4, 7,8, 8,2);

4.2 Pärast värvimist ja märgistamist lisati vastavalt erineva pH-ga puhvrid ja nigeritsiini (lõppkontsentratsioon 10 ug/mL) ning fluorestsentsi intensiivsust mõõdeti pärast 10-minutilist inkubeerimist 37 kraadi juures valguse eest kaitstud inkubaatoris;

4.3 Fluorestsentsi intensiivsuse ja pH graafikute joonistamine proovi pH arvutamiseks.

Märkus: pH kalibreerimise nigeritsiini meetod on ainult viitamiseks, saate valida vastava meetodi vastavalt oma katsevajadustele. Üldiselt, mida kõrgem on fluorestsentsi intensiivsuse suhe, seda kõrgem on pH.

5. Fluorestsentsanalüüs:Rakusisene pH tase tuvastatakse ja analüüsitakse ensüümmarkeri ja muude seotud instrumentidega. Tavaliselt rakendatakse BCECF, AM kahekordse ergastuse suhtes: EX/EM=490/530 nm : EX/EM=440/530 nm.

 

 

1. Erinevate rakkudevaheliste omaduste ja eeltöötluste tõttu on kasutatud sondide osakaal ja etappides kirjeldatud inkubatsiooniaegade vahemik üksnes viitamiseks ja seda saab igal üksikjuhul eraldi reguleerida.

2. Fluorestseeruvad värvained võivad kustuda, seega püüdke vältida valgust, et fluorestsentspuhangut aeglustada.

3. BCECF, AM on niiskuse suhtes väga tundlik, kui kasutate seda esimest korda, jagage see vastavalt katsekorraldusele ja vältige korduvat külmutamist ja sulatamist. BCECF, AM analüüsi töölahus tuleks valmistada ja kasutada kohe.

4. Enne kasutamist loksutage korralikult, et tagada täielik lahustumine.

5. Selle sondi tööpõhimõtte kohaselt ei saa rakke fikseerida ega perforeerida.

6. Oma tervise ja ohutuse tagamiseks kandke töötamise ajal laborikitlit ja kindaid.

 

Ainult uurimistööks kasutamiseks!

 

 

Kuum tags: bcecf, am fluorestsentsi ph analüüsi komplekt, Hiina bcecf, am fluorestsentsi ph analüüsi komplekti tootjad, tarnijad, tehas